XSELECT HSS XP色譜柱的使用
為了確保XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱始終保持理想性能,請遵循以下原則:
a. 樣品制備
1. 樣品中的雜質和/或顆粒通常會造成色譜柱污染。避免色譜柱污染的方式之一是使用Waters Oasis?或Sep-Pak?固相萃取(SPE)產品。
2. 優先選用初始流動相條件或更弱的溶劑制備樣品,以獲得理想的峰形和靈敏度。
3. 如果未使用流動相制備樣品,請確保樣品、溶劑和流動相可以混溶,以避免樣品和/或緩沖液產生沉淀。
4. 用0.2μm濾膜過濾樣品,去除顆粒物質。如果用于溶解樣品的溶劑中含有機溶劑(如乙腈、甲醇等),請確保濾膜/過濾器材料與該溶劑不相容。或者,可以考慮在8000 rpm下離心樣品溶液20 min,然后將上清液轉移至適當的樣品瓶中。
b. pH范圍
溫度、流動相pH值以及所用緩沖液/添加劑類型將共同影響色譜柱的使用壽命。表5列出了XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱的建議緩沖液和添加劑。
注:在pH、溫度和壓力限值組合條件下運行會導致色譜柱使用壽命縮短。
c. 溶劑
為了保持理想的色譜柱性能,請使用高品質HPLC級溶劑或MS級溶劑。所有水相緩沖液在使用前都應使用0.2μm濾膜過濾。含有懸浮顆粒物的溶劑常常會堵塞色譜柱入口的篩板,
這會導致柱壓增大或者峰形變形。
d. 壓力
XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱兼容HPLC、UHPLC和UPLC背壓。表6所示為操作壓力上限。
e. 溫度
XSelect HSS XP 2.5μm色譜柱只可耐受中等溫度條件,以改善選擇性、降低溶劑粘度和提高傳質速率。
注:在極端pH、溫度和壓力組合條件下運行會導致色譜柱使用壽命縮短。